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Invitrogen Anza限制性内切酶克隆系统闪亮登场

人阅读 发布时间:2020-07-14 14:56

Invitrogen™ Anza™限制性内切酶克隆系统闪亮登场,其包含一系列限制性内切酶和多种DNA修饰酶
是一个使用统一缓冲液的完整克隆系统——极致简约、完美克隆。

  • 所有限制性内切酶均使用一种统一缓冲液
  • 所有类型的DNA均使用一种统一酶切方案
  • 15分钟内完成酶切
  • 即使过夜酶切也不会出现星号活性
  • Anza限制性内切酶克隆完整系统由以下部分组成:
  • 128种限制性内切酶 5种DNA修饰酶

  • T4 DNA 连接酶预混液
  • 热敏碱性磷酸酶
  • T4多聚核苷酸激酶试剂盒
  • DNA平端化试剂盒
  • DNA末端修复试剂盒
  • 所有的Anza限制性内切酶可以同时进行酶切,并且只需一种统一Anza缓冲液便能充分发挥出全部功能。

Anza™限制性内切酶仅需15分钟即可酶切完全,且一个统一酶切方案适用于所有DNA类型。

在15分钟内完成质粒DNA和PCR产物的酶切


质粒DNA预期酶切DNA片段:
Anza 11 EcoRI, Anza 12 XbaI, Anza 1 NotI - 6,215 bp
纯化后的PCR产物预期酶切DNA 片段:
Anza 11 EcoRI - 1,133 & 506 bp
Anza 12 XbaI - 1,077 & 562 bp
Anza 1 NotI - 1,258 & 381 bp

图1. Anza限制性内切酶在15分钟内完成酶切反应。 使用Anza 11 EcoRI、Anza 12 XbaI和Anza 1 NotI对质粒DNA(6,215 bp)和纯化的PCR产物(1.6 kb)进行酶切。
按照推荐的方案配置反应混合液,在20µL最终体积内含有1 µg DNA和1 µL的限制性内切酶。在37°C孵化15分钟。

  • L - 1 Kb Plus DNA Ladder
  • C1 – 未酶切的质粒DNA
  • 1 – Anza™ 11 EcoRI
  • 2 – Anza™ 12 XbaI
  • 3 – Anza™ 1 NotI
  • C2 – 未酶切的PCR片段
  • 4 – Anza™ 11 EcoRI
  • 5 – Anza™ 12 XbaI
  • 6 – Anza™ 1 NotI

质粒DNA的酶切

















图2. Anza限制性内切酶在15分钟内完成酶切反应。 使用Anza 3 BcuI和 Anza 47 Eco521对质粒DNA(6,215bp)进行酶切,
同时使用竞争对手N 的SpeI-HF(BcuI的同裂酶)和EagI-HF(Eco52I的同裂酶)。按照推荐的实验方案,
反应混合物包括1 µg DNA 和1 µL Anza限制内切酶,总反应体积为20µL。按照竞争对手N推荐的实验方案,
反应混合物包括1 µg DNA 和1 µL竞争对手N的限制性内切酶,总体积50 µL。按照推荐的实验方案,
Anza限制性内切酶和竞争对手N 的EagI –HF都在37°C条件下孵化15分钟。按照竞争对手N的推荐方案, SpeI-HF在37°C条件下孵化5分钟。

  • L - 1 Kb Plus DNA Ladder
  • C – 未酶切的质粒DNA
  • 1 – Anza™ 3 BcuI
  • 2 – SpeI-HF (Competitor N)
  • 3 – Anza™ 47 Eco52I
  • 4 – EagI-HF (Competitor N)

PCR产物的酶切















图3. Anza限制性内切酶在15分钟内完成酶切反应。 使用Anza 3 BcuI、Anza 9 NdeI和Anza 47 Eco521对纯化的PCR产物(6,215bp)进行酶切,
同时使用竞争对手N的SpeI-HF(BcuI的同裂酶)、NdeI和EagI-HF(Eco52I的同裂酶)。按照推荐的实验方案,反应混合物包括1 µg DNA
和1 µLAnza™限制内切酶,总反应体积20µL。按照竞争对手N推荐的实验方案,反应混合物包括1 µg DNA 和1 µL 竞争对手N的限制性内切酶,
总体积50 µL。37°C条件下孵化15分钟。

  • L - 1 Kb Plus DNA Ladder
  • C – 未酶切的DNA
  • 1 – Anza 3 BcuI
  • 2 – SpeI-HF (Competitor N)
  • 3 – Anza 9 NdeI
  • 4 – NdeI (Competitor N)
  • 5 – Anza 47 Eco52I
  • 6 – EagI-HF (Competitor N)

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