Qubit RNA IQ检测使用了两种独特的染料—一种可特异性与大片段、完整性好或具有高级结构的RNA结合，而另一种可选择性与小片段、降解的RNA进行结合（图1）。 因此，二者相结合便可对RNA样品的质量及完整性进行快速的评估。 当使用时，仅需将样品加入到RNA IQ工作缓冲液中，即可在Qubit 4荧光定量仪上完成测定。 检测将会提供一个RNA样品的完整性、质量或者RNA IQ#的总数值，以及样品中的大片段RNA及小片段RNA的百分比（ 图2）。 类似于其他RNA质量评分系统，RNA IQ#也会提供1-10的打分结果，而越大的IQ#则意味着样品中存在着越多的大片段或具有高级结构的RNA。 相反，越小的IQ#则意味着样品中的RNA主要由小RNA或三级结构不完整的RNA所组成（ 图3）。

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图 1. 适用于不同大小RNA的RNA IQ试剂选择性。 通过Qubit RNA IQ试剂盒在Qubit 4荧光定量仪上检测三组含有100 ng/mL rRNA（E.coli）的重复样品以及不同浓度（0到50 ng/μL）的siRNA样品（Q33221，Q33222）。 根据这些样品的相对荧光单位（RFU）(A)以及 IQ#(B)绘制散点图。  
 

 

图 2. Qubit 4荧光定量仪及Qubit RNA IQ检测试剂盒结果。
 

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图3 含有不同大小RNA浓度溶液的Qubit RNA IQ荧光结果及IQ#。 通过Qubit RNA IQ检测试剂盒检测三组由小RNA (Silencer Select GAPDH siRNA）以及大RNA (rRNA，E.coli）所组成的总量100ng/mL RNA溶液重复样品。 （货号： Q33221，Q33222），Qubit 4荧光定量仪结果。 根据这些样品的相对荧光单位（RFU）(A)以及 IQ#(B)绘制散点图。

Qubit 4荧光定量仪与RNA IQ检测试剂盒相结合

我们最新的Qubit荧光定量仪—Qubit 4，在所有之前Qubit定量检测功能的基础上，特异性地增添了适配RNA IQ检测试剂盒的功能。 需要特别注意的是，RNA IQ检测试剂盒不能在之前版本的Qubit仪器上使用，包括初代版本的Qubit、Qubit 2.0以及Qubit 3.0。