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提高移液准确度的 10 个步骤

人阅读 发布时间:2020-09-28 10:30

第 1 步


预先润湿移液器吸头

吸液之前,重复抽吸并完全排出一定量的液体至少三遍。未能预先润湿吸头会增加吸头空隙内的蒸发,可能导致移液量大大降低。预先润湿可增加吸头内的湿度,减少蒸发。

第 2 步


在温度平衡下工作

移液前,使液体和设备平衡至环境温度。气体活塞式移液器移取的液体量随液体的相对湿度和蒸气压发生变化,两者均取决于温度。在恒定温度下操作可尽可能减少移液体积的变化。



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温差可引起空隙热膨胀和收缩。温度平衡后,影响因素为液体密度。与室温液体相比,冷液体的密度更高,而热液体的密度更低。

第 3 步


检查移液器吸头上是否含有液滴

分液前,将吸头轻触储液瓶侧面,小心去除吸头外部液滴,确保远离吸头开口处,以免液体从吸头中流出。分液后和释放柱塞前,吸头轻触容器侧边,清除吸头中的残留液体。表面张力将有助于将残留液体排出吸头。

第 4 步


根据液体类型选择正向或反向移液

按压柱塞至第一档,将吸头浸入液体,然后释放柱塞进行吸液。使移液器离开液体,然后按压柱塞至第二档以分配全部液体。除粘性或挥发性液体外,所有其他溶液的标准(或正向)模式移液均比反向模式具有更高的准确度和精密度。反向模式通常会导致超量。因此,建议评估实验中可能出现的超量移液的影响并根据需要进行调整。



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在该实验中,使用正向和反向移液技术将 200 μL 粘性液体(甘油)移液 10 次。使用正向移液技术,调整所使用的移液器以适用于移取甘油。该图描述了这两种技术获得的准确度和精密度。

使用反向方法时,观察到剂量之间的偏差更小,因此降低了误差。

由于吸头中的液柱更高,因此反向方法剂量更大,而高于剂量的液体量会排出更多。

第 5 步


暂停时间保持一致

吸液后和吸头离开液体之前,请暂停一秒钟。使此暂停操作尽可能保持一致。柱塞停止移动后,液体会在短时间内持续流入吸头。同时,在吸头内出现蒸发。暂停时间保持一致可以平衡这两种影响,并确保正确吸液。

第 6 步


从容器中直接取出移液器

吸液时,垂直握住移液器,然后将移液器从储液器中心直接移出。当移取少量(低于 50 µL)液体时,该技术尤为重要。将移液器从液体中移出时,以一定的角度握住移液器会改变吸取液体量。

第 7 步


尽可能减少移液器和吸头的处理

轻轻握住移液器,并利用手指支托。每次移液后务必将移液器放回至移液器支架上。避免徒手操作移液器吸头或储液器。处理过程中传递的人体热量会破坏温度平衡,从而导致移液量出现偏差。

第 8 步


使用正确的浸入深度

吸液前,将吸头充分浸入液柱弯液面以下。浸入太浅(尤其当使用大容量移液器时)可导致吸入空气。浸入太深可导致液体粘在吸头外部。吸头接触容器底部可能会影响吸液。



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第 1 步:将吸头浸入正确的深度并正确垂直固定。

第 2 步:吸头浸入太深时,误差会加倍。

第 3 步:将移液器保持在 30-40° 角度时,浸入太深会导致误差增加三到五倍。

第 9 步


使用正确的移液器吸头

使用移液器专用的高品质吸头。系统吸头旨在与匹配的移液器配合使用。吸头和移液器不匹配可导致移液不准确、不精确或两者兼具。质量体系吸头由优质材料制成且无成型缺陷可提供气密性密封。还可以确保可靠进行移液。
平稳按下柱塞,直至在第一档处以轻且稳定的力使其静止。浸入吸头,然后以恒定速率释放柱塞。重复性操作可产生重现性结果。

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